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细胞爬片的固定的方法有哪些?
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一   将盖玻片从24孔板中取出后,用PBS冲洗3次,再放入丙酮中固定5分钟,室温下凉干即可将其贴在载玻片上,-80度保存备用!注意,丙酮很容易挥发,为节约资源,最好在密闭容器中固定!
 

1.免疫组化的爬片是用冷丙酮固定15-20分,室温凉干后,-20度保存或直接做。
 
2.TUNEL和DAPI染色,均用4%的多聚甲醛固定20-30分钟。我做TUNEL时还用冷甲醇固定过,因为多聚甲醛可以自发荧光,为了避免假阳性。
 

1 免疫组化的爬片是用PBS冲洗3次,冷丙酮固定,这个大家都差不多,偶也做过。
 
2 我们这里也用4度甲醇:丙酮1:1的比例,固定十分钟,效果很好,我屡试不爽哦。
 
3 对于抗原表达在细胞膜的爬片,最好用温和一点的固定剂,如:多聚甲醛,效果更好一些!对于贴壁不牢的片子,最好用丙酮固定,多聚甲醛有时会在固定时细胞整片漂起。要是不用盖玻片直接在六孔板里做的话,用丙酮很容易花板,这一点也要注意。

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